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分子生物學方法
點擊次數(shù):401 更新時間:2016-04-12

    目前所有*的細胞因子的基因均已克隆化,故能較容易地得到某一細胞因子的cDNA探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。利用基因探針檢測細胞因子mRNA表達的方法多種多樣,常使用斑點雜交、Northern blot、逆轉錄PCR,細胞或組織原位雜交等。實驗的關鍵在于制備高質量的核酸探針和獲得合格的待測物(提取的mRNA樣品或細胞/組織標本)。ELISA試劑盒

    核酸探針是指一段用放射性同位素或其他標記物(如生物素等)標記并與ELISA試劑盒目的基因互補的DNA單鏈DNA、RNA。根據(jù)其來源可分為cDNA探針、寡核核苷酸探針、基因組基因探針及DNA探針等。其中cDNA探針和人工合成寡核苷酸探針常用于斑點雜交及Northern blot,而RNA探針因穿透性好更適用于原位雜交。核酸探針技術的應用已經程序化,近年來出現(xiàn)的RT-PCR檢測特異性mRNA的方法也廣泛用于細胞因子研究領域。該法具有靈敏、快速等優(yōu)點,甚至從1~10個細胞中就可檢出其中的特異mRNA。
    上述三種方法,各有優(yōu)缺點,可互相彌補,在實際應用中,可根據(jù)各自的實驗目的和實驗室條件進行選擇。生物學檢測法比較敏感,又可直接測定生物學功能,是ELISA試劑盒zui可靠的方法,適用于各種實驗目的,是科研部門zui常用的技術,但需要長期培養(yǎng)依賴性細胞株,檢測耗時長,步驟繁雜,影響因素多,不容易熟練掌握。免疫學檢測法比較簡單,迅速,重復性好,但所測定的只代表相應細胞因子的量而不代表活性,同時敏感度也低于生物活性檢測法(約低10~100倍)。分子生物學法只能檢測基因表達情況,不能直接提供有關因子的濃度及活性等資料,主要用于機制探討。在檢測細胞因子時,必須考慮到細胞因子的作用具有網(wǎng)絡性的特點,人們需明確檢測方法所測定的細胞因子成分,并考慮其抑制劑和可溶性受體的水平,將各種結合使用,有可能得到較為可靠的結果。

LRG1    富含亮氨酸α2糖蛋白抗體
LPPR4    腦特異性磷脂酸磷酸酶樣蛋白1抗體
LR8    跨膜蛋白TMEM176B抗體
LRRTM2    富含亮氨酸重復跨膜神經元蛋白2抗體
LRRTM4    富含亮氨酸重復跨膜神經元蛋白4抗體
LZIC    LZIC蛋白抗體
LGI3    Lgi3蛋白抗體
Lhx4    Lhx4蛋白抗體
Lunatic Fringe    信號轉導分子SCDO3抗體
LEO1    RNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體
LCMV    淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒蛋白抗體
LC3A/B    自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體
Gonadoliberin-1    黃體激素釋放激素/促性腺激素釋放激素抗體
LRRC23    LRRC23蛋白抗體

ELISA試劑盒
 

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