本公司代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息,請(qǐng)咨詢(xún)?cè)诰€(xiàn)客服。 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 | 大鼠支氣管上皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū) | Rat bronchial epithelial cells | 5×105cells |
產(chǎn)品特點(diǎn): 1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 ? 細(xì)胞培養(yǎng)技巧: 一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng): 1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 % 2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類(lèi)而異。腺癌類(lèi)的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類(lèi)細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。 凍存的步驟: 1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情形。 2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。 3. 依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。 4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻, 分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。 5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中,再放入液氮槽中。程序?yàn)? program 7: HB CELL 。 培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。 兔核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔CD163分子(CD163)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔促有絲分裂因子(MF/MPF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SPC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔心肌肌鈣蛋白T(c/TNNT2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔D-乳酸脫氫酶(D-LDH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔干細(xì)胞因子受體(SCFR/c-Kit)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔多配體聚糖1(SDC1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔二肽基肽酶X (DPP10)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔固醇類(lèi)生成因子1(SF1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 兔甲狀旁腺激素(PTH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 大鼠支氣管上皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)芐螨;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 111872-58-3 規(guī)格: 0.1g 訂購(gòu)|咨詢(xún) 右旋苯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 26046-85-5 規(guī)格: 0.1g 訂購(gòu)|咨詢(xún) 噻嗪;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 69327-76-0 規(guī)格: 0.1g 訂購(gòu)|咨詢(xún) ;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 規(guī)格: 0.25g 訂購(gòu)|咨詢(xún) 木糖醇-對(duì)照品;有報(bào)告 CAS 87-99-0 規(guī)格: 1g 訂購(gòu)|咨詢(xún) 檸檬酸;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 77-92-9 規(guī)格: 0.1g 訂購(gòu)|咨詢(xún) 山梨酸;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 110-44-1 規(guī)格: 0.25g 訂購(gòu)|咨詢(xún) 半邊旗5F CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 4-β-D-葡萄糖基-1,3,7-三羥基 CAS 81991-99-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 柯皂苷元 CAS 467-55-0 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 纖精 CAS 567-75-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 香紫蘇二醇 CAS 55881-96-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 澤蘭黃 CAS 520-11-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 異古倫賓 CAS 471-54-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) |