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產(chǎn)品展示
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Masson三色染色液
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產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
Masson三色染色液公司正在出售的產(chǎn)品:2 ug pET-3b pET-3b 低溫運(yùn)輸,-20℃保存紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(顆粒) 250g100U Tfl DNA聚合 Tfl DNA Polymerase -20℃保存100mL PEG-LiOAc Solution,10X PEG-LiOAc Solution,10X 常溫保存0.1mL×10 JM109化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 JM10
  Masson三色染色液的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

Masson三色染色液


7×50ml|7×100ml

BJ-01X6756

商品詳細(xì)介紹:

用途:

經(jīng)典膠原纖維染色,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

注意事項(xiàng):

染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維,本試劑盒采用經(jīng)典的Weigert蘇木素。其結(jié)果為:膠原纖維呈藍(lán)色,胞核呈藍(lán)褐色肌纖維、紅細(xì)胞等呈紅色。

儲存條件:室溫,避光,12個(gè)月

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
2.png

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Peste Des Petits Ruminants Virus Vaccine Strain (PPRV-Vaccine)小反芻獸疫病毒疫苗株RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周OTUB  泛素特異性蛋白Otubain2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Leishmania siamensis泰國利什曼原蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-PDPK1(Ser393)  磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Sowbane Mosaic Virus(SoMV)藜草花葉病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Hyaluronidase-PH20/Haase  透明質(zhì)酸/玻璃酸抗體 規(guī)格: 0.1ml

Herba artemisiae annuae青蒿PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周RAP1GDS1  G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Chlamydophila spp. 嗜衣原體通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周IL-17F/IL-24  白介素-17F抗體 規(guī)格: 0.2ml

Tomato Chlorotic Spot Virus(TCSV)番茄褪綠斑病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Lamin B2  核纖層蛋白B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Fructus citri香櫞探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周RNF10  環(huán)指蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2ml

Amidostomum anseri鵝裂口線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

Bovine Viral Diarrhea Virus 2 (BVDV-2)牛病毒性腹瀉病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周BCHE(1E8)  丁酰酯單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml

Equine Rhinopneumonitis Virus(ERV)馬鼻肺炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CCRK  細(xì)胞周期相關(guān)激抗體 規(guī)格: 0.1ml

Masson三色染色液大鼠尿激(UK)免疫試劑盒*直銷

人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠補(bǔ)體片斷3(C3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

D受體(VD R)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

魚黃體生成素(LH)免疫試劑盒*直銷

A(IgA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

麥康凱瓊脂(MAC) 英文名稱:MaConkey Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)免疫試劑盒*直銷

抗生素5號 英文名稱:Antibiotic NO.5 產(chǎn)品規(guī)格:250g

人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

HBI阪崎腸桿菌生化鑒定條(GB) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5條/盒

 


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