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產(chǎn)品展示
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線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)
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產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)公司正在出售的產(chǎn)品:2 ug pBKS-c-Flag pBKS-c-Flag 低溫運(yùn)輸,-20℃保存250mL DN75%乙醇 2 ug pFastBac HT-CAT pFastBac HT-CAT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存鹽緩沖稀釋液(ph7.2) 9ml*20支1瓶 Ca761細(xì)胞株 Ca761 低溫運(yùn)輸和保存
  線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)


100T

BJ-01X6586

商品詳細(xì)介紹:

小牛胸腺提取的組蛋白H1,以Alexa Fluor488 標(biāo)記富含賴的組蛋白H1。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中可以通過搭配相應(yīng)的蛋白轉(zhuǎn)染步驟,將Alexa Fluor488 標(biāo)記的組蛋白H1 結(jié)合物導(dǎo)入細(xì)胞中,從而跟蹤研究組蛋白H1 在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸與定位。

具有細(xì)胞膜滲透性的MitoRed 探針包含一個(gè)溫和的巰基反應(yīng)性氯甲基基團(tuán),可用于標(biāo)記線粒體,并在固定之后保留在線粒體內(nèi)。標(biāo)記線粒體,細(xì)胞可以與MitoRed 探針簡單孵育,探針通過被動(dòng)擴(kuò)散傳過質(zhì)膜,并在有活性的線粒體內(nèi)富集。

細(xì)胞核熒光染料Hoechst 33258 是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物,具有很好的膜透性,可作為熒光探針與DNA 分子結(jié)合。

儲存:4℃避光,有效期12個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
2.png

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Equine Rotavirus馬輪狀病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Rhizoma wenyujin concisum片姜黃探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Flos sophorae槐花探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Streptococcus canis犬鏈球探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Herba plantaginis車前草染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Porcine Transfusion Transmitted Virus(PTTV)豬輸血傳播病毒PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Mannheimia granulomatis肉芽腫性曼氏桿病LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Paenibacillus mucilaginosus膠凍樣類芽孢桿染料法qPCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 1-3天

BK病毒(BK Virus、BKV)探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

羽扇豆源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Radix asparagi天冬探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Chlamydophila pneumoniae 肺炎嗜衣原體LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)人泛素結(jié)合E2D2(UBC4/5的同源物,酵母)(UBE2D2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

N6培養(yǎng)基 英文名稱:N6 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

Traf2結(jié)合蛋白(T2BP)免疫試劑盒*直銷

豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)免疫試劑盒*直銷

犬骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠生長激素(GH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

馬甘肽還原(GSR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠胰蛋白(trypsin)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)免疫試劑盒*直銷

 


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位 分析試劑盒
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