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心肌ATPase染色液
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產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
心肌ATPase染色液公司正在出售的產(chǎn)品:1瓶 HUVEC細(xì)胞株 HUVEC 低溫運(yùn)輸和保存李氏菌增菌肉湯(LB2) Listeria Enrichment Broth Base 9ml*20支/包50µg Xa因子蛋白 Factor Xa Protease -20℃保存125mL RNase-Free TE Buffer(無(wú)RNase的TE緩沖液),pH8.0 RNase-Free TE
  心肌ATPase染色液的詳細(xì)資料:

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱:心肌ATPase染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X6817

用途:

腺苷三磷酸酶染色,心肌線粒體ATPase染色或者膜性ATPase染色

注意事項(xiàng):

主要由孵育液、硫化液、陰性對(duì)照等組成。染色后酶活性部位呈棕黑色。

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


QQ截圖20220509112004.png

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

Treponema vincentii文氏密螺旋體LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周BLAME/SLAMF8  BLAME抗體 規(guī)格: 0.1ml

Avian Paramyxovirus (APMV)禽副粘病毒通用探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒(暫停) 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-IRF3(Ser386)  磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cortex mori桑白皮染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周ROS/c ros  活性氧簇ROS抗體 規(guī)格: 0.1ml

Subulura brumpti布氏錐尾線蟲(chóng)LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周IASPP  瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體 規(guī)格: 0.1ml

Elaeophora schneideri施氏油脂線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周STK31  絲/蘇蛋白激31抗體 規(guī)格: 0.2ml

Radix cynanchi atrati白薇LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Collagen II/Chondrocalcin  Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 規(guī)格: 0.1ml

Camel Pox Virus(CPV駱駝痘病毒LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周SLC2A4RG/GLUT4 enhancer factor  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

Trypanosoma brucei gambiense布氏岡比亞錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2  α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2) 規(guī)格: 0.2ml

Avian Nephritis Virus 1(ANV-1)禽腎炎病毒1型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-rat IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Hepatitis B Virus Pregenomic RNA(HBV pgRNA)乙型肝炎病毒前基因組RNA 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X  母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

心肌ATPase染色液人心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

鮭魚(yú)促胰液素/胰泌素(SCT)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

人泡狀過(guò)表達(dá)癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)免疫試劑盒*直銷

腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂) 英文名稱:Bile Aesculin Azide Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

人抗核抗體(ANA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

乳糖發(fā)酵管(軍團(tuán)菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

人二?;视?/span>(DAG/DG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

WPM培養(yǎng)基 英文名稱:WPM Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

Toll樣受體3(TLR3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

豬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

犬高遷移率族蛋白A1(HMGA-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 心肌ATPase 染色液
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