產(chǎn)品參數(shù): 中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 | 改良Harris蘇木素染色液 |
| 100ml|500ml | BJ-01X6832 |
商品詳細介紹: 用途: 屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,適用于細胞核染色,尤其適用于臨床紙片染色。 注意事項: Harris蘇木素染色中l(wèi)eagene推薦采用該試劑。細胞核染色的選擇性和保存時間優(yōu)于Harris蘇木素染色液,對細胞核染色較深,染色一般5-8分鐘,存儲太久后,使用時應(yīng)過濾。 儲存條件:室溫,12個月 |
實驗報告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 培養(yǎng)操作步驟 : 1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。 Lignum aquilariae resinatum沉香PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho CSF1R (Tyr699) 磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Serratia marcescens粘質(zhì)沙雷LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TLS/FUS 粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體 規(guī)格: 0.2ml Corynebacterium bovis牛棒桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-CSF2RB (Tyr766) 磷酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml Fructus ligustri lucidi女貞子染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周EVC2 膜蛋白EVC2抗體 規(guī)格: 0.1ml Porcine Endogenous Retrovirus(PERV)豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-human IgG(3D3)/RBITC 羅丹明標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml Babesia canis犬巴貝斯蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Leptin receptor/OB-R 瘦素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Cortex dictamni白鮮皮LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周TRPV1/VR1 辣椒素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus、GaHV)禽皰疹病毒通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周C3orf23 3號染色體開放閱讀框23抗體 規(guī)格: 0.2ml Fowlpox Virus(FPV)雞痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Insulin Receptor Beta 胰島素受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml Human Parainfluenza Virus 4B(HPIV-4B)人副流感病毒4B型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ADAM32 去整合素樣金屬蛋白32抗體 規(guī)格: 0.2ml 改良Harris蘇木素染色液牛脂酰輔A合成免疫試劑盒進口、分裝 小鼠Ⅵ(FⅥ)免疫試劑盒進口、組裝 雞卵清白蛋白免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 小鼠β葡萄糖醛酸苷(βGD)免疫試劑盒進口、分裝 大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒進口、分裝 兔乙?;囸I激素(aGHRL)免疫試劑盒進口、組裝 大鼠活化素B(ACV-B)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)免疫試劑盒*直銷 大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)免疫試劑盒*直銷 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)免疫試劑盒進口、組裝 平板計數(shù)肉湯(PCB) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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