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磷脂酶D測試盒50管/48樣
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磷脂酶D測試盒50管/48樣公司正在出售的產品:0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 2 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Proheparin-binding EGF-like growth factor 0.156-10 ng/mL 轉基因植物S
  磷脂酶D測試盒50管/48樣的詳細資料:

商品介紹:

測定意義:

磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應的一類酶的總稱,廣泛存在于高等動植物和細菌等多種生物體中,具有參與細胞脂質代謝、信號傳導、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

測定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和,在氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫,過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基林和重蒸酚氧化成粉紅色物質,在500nm處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,無水乙醇。

產品屬性:

產品名稱:磷脂酶D測試盒50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產品分類:脂肪酸代謝系列

產品規(guī)格: 50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產品貨號:BJ-01S9845

圖片1.png 

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
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