中文名稱:改良番紅O-固綠軟骨染色液 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5×50ml|5×100ml 產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X6743 用途: 軟骨染色 注意事項(xiàng): 主要由固綠染色液和番紅O染色液組成。染色時(shí),注意分化時(shí)間,否則容易導(dǎo)致過(guò)染或脫色 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。 Varroa destructor狄斯瓦螨探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 1-2周CDKL3/NKIAMRE 細(xì)胞周期蛋白依賴性激樣3抗體 規(guī)格: 0.2ml Pseudobulbus cremastrae seu pleiones山慈菇LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml Equine Viral Arteritis Virus馬病毒性動(dòng)脈炎病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG 規(guī)格: 1mg Feline Herpes Virus貓庖疹病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Bestrophin 4 卵黃狀黃斑蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml Gremmeniella abietina冷杉枯梢病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周BRCC4/BRCC45 易基因復(fù)合蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml Rhizoma paridis重樓PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Goat anti-Rabbit IgG whole serum 羊抗兔IgG抗清 規(guī)格: 1ml Equine Herpesvirus 1 (EHV-1)馬皰疹病毒1型LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-ITGB4(Tyr1494) 磷酸化整合素β4抗體 規(guī)格: 0.1ml Corynebacterium minutissimum極小棒桿探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周LARG Rho的核苷酸交換因子12抗體 規(guī)格: 0.2ml Ganoderma靈芝染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml Swine Vesicular Disease Virus(SVDV)豬水泡病病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-Tau protein(Ser214) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 改良番紅O-固綠軟骨染色液山羊甘肽還原(GSR)免疫試劑盒*直銷(xiāo) 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 人纖維介素蛋白(fgl2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 植物玉米素核苷(ZR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人檸檬酸合成,線粒體(CS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 7.5%氯化鈉肉湯 英文名稱:7.5% Sodium Chloride Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 人抗補(bǔ)體1q抗體(anti-C1q-antibody)免疫試劑盒*直銷(xiāo) 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:100ml*20瓶 人對(duì)氧磷-3(PON3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 MR-VP 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 操作規(guī)程 1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí). 2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。 3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。 4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。 7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。 8、結(jié)果分析 a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
|